牛蒡组织培养和高频植株再生的研究
通过对牛蒡(Arctium lappa L.)不同外植体、不同激素配比的比较研究,建立了牛蒡离体培养高效植株再生体系.牛蒡子叶与下胚轴切段在含2.0 mg/L 2,4-D和0.5～2.0 mg/L BA的MS培养基中愈伤组织诱导率可以达到87%～100%;在1.0～3.0 mg/L NAA和0.5～2.0 mg/L BA的MS培养基上通过愈伤组织间接分化或外植体直接分化形成不定芽,其中愈伤组织分化率可达100%;下胚轴的分化率明显高于子叶,在1.0 mg/L NAA和1.0 mg/L BA的MS培养基上下胚轴直接分化率达77.3%.组织学观察发现牛蒡再生有器官发生和体细胞胚发生两种途径.将生长状态良好的不定芽转至含1.0 mg/L IBA和1.0 mg/L NAA的1/2 MS培养基上生根,移栽,成活率达到93.3%.从诱导愈伤组织到组培苗在珍珠岩中过渡成活,大约需要13周.组培苗次年开花并结实,生长形态特征正常.关键.同种植物不同器官的组织由于组成分的差异,提取RNA的方法也存在不同的难点.在苯酚法和氯化锂沉淀法的基础上,改进并提出了一种适合小麦叶片总RNA的快速提取方法,消除了蛋白质、DNA、多糖、多酚等污染.该方法提取的小麦叶片总RNA,完整性好、纯度高,可用于RT-PCR、Northern杂交、RACE等实验操作,而且简单经济、快速、实验结果稳定,重复性好,还适合富含多糖和脂质的植物组织总RNA的提取.
侯岁稳,HOU Sui-wen(兰州大学,生命科学学院,兰州,730000;中国科学院近代物理研究所,兰州,730000)
刊 名： 西北植物学报 ISTIC PKU 英文刊名： ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA 年，卷(期)： 2006 26(2) 分类号： Q813.1 Q949.783.5 关键词： 牛蒡 愈伤组织 组织培养 器官发生 胚状体发生途径