金黄色葡萄球菌外毒素B特异性适体的筛选及其应用
目的:利用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术,筛选能与金黄色葡萄球菌外毒素B(SEB)特异、高亲和力结合的单链DNA(ssDNA)适体,并将该适体应用于患者血清标本的检测.方法:从体外合成的96核苷酸随机ssDNA文库中,以羧基磁珠作为筛选介质,经逐步PCR扩增、筛选,获得针对SEB的高亲和力、高特异性适体;利用荧光素标记适体测定筛选过程中各轮结合力;利用酶连接适体方法检测适体特异性和结合力.结果:经过13轮筛选,ssDNA文库与SEB的结合百分率从1.1%提高到39.8%,增加了36倍;获得的ssDNA适体(A11)针对SEB的特异性强,与金黄色葡萄球菌表面蛋白A(SPA)结合低,并能初步识别患者血清.结论:利用SELEX技术筛选获得了特异结合SEB的高亲和力的ssDNA适体,为金黄色葡萄球菌的临床诊断与治疗奠定了基础.
兰小鹏,LAN Xiao-Peng(福建医科大学,福州总医院临床医学院,福建,福州,350025;南京军区福州总医院,全军医学检验研究所,福建,福州,350025)
马立强,MA Li-Qiang(南京军区福州总医院,全军医学检验研究所,福建,福州,350025)
刊 名： 生物技术通讯 ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2010 21(2) 分类号： Q789 关键词： 指数富集的配体系统进化技术 金黄色葡萄球菌外毒素B 适体