β淀粉样肽单克隆抗体可变区基因的5RACE扩增及序列分析
目的:克隆并分析抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因.方法:从分泌抗β淀粉样肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株A8中提取总RNA,根据恒定区序列设计基因特异性引物,通过5'RACE法扩增抗体的轻链和重链可变区基因,测定并分析可变区基因序列,并克隆入pMD18-T载体.结果:重链可变区基因序列全长450 bp,编码150个氨基酸残基;轻链可变区基因序列全长429 bp,编码143个氨基酸残基.在GeneBank中对氨基酸序列进行比对分析,二者均符合小鼠IgG可变区基因的特征.根据Kabat法则对A8抗体轻链和重链可变区氨基酸序列基因进行分析并确定了3个抗原互补决定区(CDR)、4个框架区(FR)和信号肽.结论:通过5'RACE法得到了抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因,为进一步研究抗体三维结构,以及对该抗体进行人源化改造奠定了基础.
作 者： 王鑫 张莹 何金生 WANG Xin ZHANG Ying HE Jin-Sheng 作者单位： 北京交通大学,生物科学与技术研究所,北京,100044 刊 名： 生物技术通讯 ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2010 21(2) 分类号： Q78 关键词： β淀粉样肽 单克隆抗体 可变区序列 5'RACE