奶山羊细菌人工染色体基因文库构建的初步研究

奶山羊细菌人工染色体基因文库构建的初步研究

细菌人工染色体(BAC)文库是进行动物基因组学研究的一个重要手段,为配合山羊乳腺生物反应器的研究,对构建山羊基因组BAC文库进行了初步研究.用HindⅢ酶对莎能奶山羊基因组进行部分酶切,用CHEF (箝位匀强电场)二次电泳法回收150 kb大小条带,电透析回收高分子量(HMW) DNA;同时以BAC载体pBeloBAC11为材料,分别采用限制性内切酶HindⅢ和HK脱磷酶对其进行酶切和脱磷,将该载体自连并通过凝胶回收线性段DNA,获得了可用于构建BAC文库的线性载体.将HMW与载体进行连接,电击转化感受态DH10β大肠杆菌,一次转化得到近2000个克隆.插入片段大小为50～200 kb,基本满足建库的需要.

作 者： 鞠辉明 张信军 李贵阳 刘宗平 成勇 JU Hui-ming ZHANG Xin-jun LI Gui-yang LIU Zong-ping CHENG Yong   作者单位： 扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009  刊 名： 扬州大学学报（农业与生命科学版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 27(3)  分类号： Q786 S852.61  关键词： 山羊   细菌人工染色体   文库构建