运动发酵单胞菌和大肠杆菌间穿梭质粒的构建
运动发酵单胞菌(Zymomonas.mobilis)是目前发现的乙醇发酵能力最强的微生物之一,被认为是进行大规模乙醇生产的潜在菌种;但由于其可利用的碳源范围窄,所以对其进行基因工程改造首先需要有较好的载体系统.以Z.mobilis内源质粒pZM2和大肠杆菌(E.coli)质粒pBR328、pACYC184为出发质粒,构建了三个Z.mobilis-E.coli之间的克隆型穿梭质粒,即pZB1、pZB21和pZB31.对它们在Z.mobilis CP4中的稳定性、拷贝数的初步比较分析表明:pZB21最稳定、拷贝数最高,pZB31次之,pZB1最差.进一步以pZB21为载体,在Z.mo-bilis CP4中表达E.coli的talB基因,酶活水平为0.087 U/mg蛋白.证明pZB21是能用于基因表达的、较为理想的Z.moblis-E.coli之间的穿梭载体.
