人白细胞介素4在衣藻叶绿体中的高效转化及表达
人白细胞介素4(hIL4)是一种重要的免疫活性调节分子,与一些自身免疫性疾病有重要关系.将hIL4基因融合到衣藻叶绿体rbcL 5'-UTR和3'-UTR之间,组成5'UTR-hIL4-3'UTR片段,将其插入到来源于衣藻叶绿体基因组5.7kb同源片段中,构建成pXhIL4同源重组质粒.利用电脉冲法将该质粒与含有aadA基因的壮观霉素抗性质粒p228共同转化衣藻叶绿体,从含100μg/mL的壮观霉素抗性平皿上筛选到阳性藻落,并通过PCR方法检测到hIL4基因,其共转化频率高达90%.经过western blotting印迹转移分析,证实了人白细胞介素4基因在衣藻叶绿体中获得成功表达,为进一步研究在衣藻叶绿体中高效表达外源蛋白奠定了基础.
作 者： 赵雅坤 史贤明 张忠明 ZHAO Ya-kun SHI Xian-ming ZHANG Zhong-ming 作者单位： 赵雅坤,史贤明,ZHAO Ya-kun,SHI Xian-ming(上海交通大学农业与生物学院,上海,201101)张忠明,ZHANG Zhong-ming(华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070)
刊 名： 华中农业大学学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 2006 25(2) 分类号： Q785 关键词： 人白细胞介素4 莱茵哈德衣藻 叶绿体基因工程 电击脉冲转化