虎纹镇痛活性肽在毕赤酵母中的分泌表达
虎纹镇痛活性肽HWAP-Ⅰ是从虎纹捕鸟蛛初毒中分离纯化,具有镇痛活性的多肽类神经毒素为了在P.pastoris中高效分泌表达HWAP-Ⅰ,依照RT-PCR的结果,人工合成编码虎纹镇痛活性肽的基因片段,与酵母表达载体pPIC9K重组,构建表达质粒pPIC9K-HWAP-Ⅰ.转化GS115宿主菌后,筛选出整合型His+MutS表达菌株.经诱导培养后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)证明HWAP-Ⅰ在毕赤酵母中能有效分泌表达,产物的分子质量为4 ku左右,产量达80 mg/L.体外小鼠输精管阻断实验证实表达产物具有明显的生物活性.
作 者： 何宁佳 聂东宋 徐辉明 李敏 梁宋平 作者单位： 湖南师范大学生命科学学院,长沙,410081 刊 名： 生物化学与生物物理进展 ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年，卷(期)： 2001 28(6) 分类号： Q78 关键词： 虎纹镇痛活性肽 毕赤酵母 分泌表达