重组杆状病毒表达尼帕病毒融合蛋白和受体结合蛋白的研究
构建了表达尼帕病毒(Nipah virus,NiV)囊膜功能糖蛋白F和G的重组杆状病毒rBac-NF、rBac-NG.Westem-blot证实大小分别为61kD和66kD的重组融合蛋白(rNF)和受体结合蛋白(rNG)分别在rBac-NF、rBac-NG感染的昆虫细胞中获得表达,并且rNF前体F0可在昆虫细胞内进一步有效裂解为F1(～49kD)和F2;采用兔抗NiV病毒高免血清间接免疫荧光检测重组杆状病毒表达F和G蛋白显示出良好的特异免疫反应原性.以rBac-NF、rBac-NG感染的昆虫细胞裂解液稀释后直接包被ELISA板,间接ELISA检测兔抗灭活NiV全病毒高免血清中的F和G蛋白特异性抗体,同样具有良好的敏感性和特异性;以rBac-NF和rBac-NG感染昆虫细胞培养物直接免疫BALB/c小鼠,可诱导显著的NiV F和G蛋白特异体液免疫反应,产生的特异抗体可有效中和NiV囊膜蛋白F和G介导的伪型VSV重组病毒侵入NiV易感宿主细胞的感染性.结果表明,杆状病毒表达重组F和G蛋白抗原具有替代NiV全病毒,作为安全、经济、敏感和特异的诊断抗原的潜力,并为重组病毒亚单位疫苗防制尼帕病毒性脑炎的探索研究奠定了基础.
葛金英,Ge Jin-Ying(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001;南京农业大学动物医学院,南京,210095)
王清华,Wang Qing-Hua(农业部青岛动物检疫所国家外来病诊断中心,青岛,266032)
秦立廷,Qin Li-Ting(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001;山东农业大学动物科技学院,泰安,271018)
刊 名： 生物工程学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(3) 分类号： Q786 关键词： 尼帕病毒 融合蛋白 受体结合蛋白 重组杆状病毒