转铁蛋白受体单链抗体与BDNF融合蛋白的表达及活性鉴定
脑源性神经营养因子(BDNF)对中枢神经系统的多种神经元具有营养、修复和保护功能,但因无法通过血脑屏障限制了其应用.利用抗转铁蛋白受体(TfR)的单链抗体(ox26-scFv)作为脑转运载体,分别扩增单链抗体和BDNF基因,插入pTIG-Trx载体,构建融合基因表达载体pTIG-Trx/scFv-BDNF,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了高效表达.经Ni-NTA金属螯合层析柱纯化后,在41kDa处可见目的纯化条带.大鼠GH3细胞免疫酶染色显示,ScFv-BDNF融合蛋白能与转铁蛋白受体特异性结合,同时能够促进鸡胚背根节神经突起的生长,具备了BDNF的生物学活性.为使BDNF能够跨越血脑屏障成为中枢神经系统的治疗药物打下了实验基础.
作 者： 颜冰 范明 黄培堂 YAN Bing FAN Ming HUANG Pei-tang 作者单位： 颜冰,黄培堂,YAN Bing,HUANG Pei-tang(军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071)范明,FAN Ming(军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850)
刊 名： 中国生物工程杂志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 26(3) 分类号： Q81 关键词： 转铁蛋白受体 单链抗体 脑源性神经营养因子 血脑屏障