GST-talin1融合蛋白的原核表达及纯化
应用PCR方法扩增talin1的cDNA,并将其重组入谷胱甘肽转硫酶融合基因表达载体pGEX-4T-1中,获取人源的GST-talin1融合蛋白,为下阶段深入的研究talin1的结构、功能、及其与之相互作用的蛋白打下基础.经酶切、序列鉴定,选择正确重组子,将其质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用Glutathione Sepharose 4B柱纯化,western blot鉴定.克隆得到了一个2400bp的talin1的cDNA片断,重组质粒目的DNA测序正确,纯化出分子量约为121.6kD的融合蛋白.用基因工程方法使GST-talin1重组质粒在原核细胞表达并成功纯化出GST-talin1融合蛋白.
作 者： 吴爽 耿建国 WU Shuang GENG Jian-guo 作者单位： 吴爽,WU Shuang(广东药学院基础学院组织胚胎教研室,广州,510006;中科院生化细胞研究所分子细胞生物学实验室,上海,200031)耿建国,GENG Jian-guo(中科院生化细胞研究所分子细胞生物学实验室,上海,200031)
刊 名： 生物学杂志 ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF BIOLOGY 年，卷(期)： 2008 25(3) 分类号： Q51 关键词： talin P-选凝素 GST-融合蛋白 亲和层析