一种新的双向电泳蛋白样品制备方法

一种新的双向电泳蛋白样品制备方法

目的 探讨双向凝胶电泳(2-DE)样品裂解液对蛋白质分离和双向凝胶电泳结果 的影响.方法 以MOLT-4细胞为例,采用3种溶解性能不同的裂解液提取细胞中的蛋白质组,并分别进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳.结果 通过对2-D PAGE图谱的比较分析,发现采用8 mol/L Urea, 2 mol/L Thiourea,4% CHAPS, 1% NP-40,4%TritonX-100,65 mmol/L DTT, 0.5 mmol/L PMSF,0.5% pharmalyte 3-10,能获得质量较高的2-DE图谱.结论 采用高浓度脲、三去污裂解液有利于获得优质的蛋白质样品,从而提高蛋白质提取率和双向电泳分辨率等.

作 者： 李小兰 谢大兴 肖徽 吴剑宏 姚静 冯永东 陶德定 刘双又 胡俊波 龚建平   作者单位： 华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤研究所分子医学中心,武汉,430030  刊 名： 华中科技大学学报（医学版）  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA MEDICINAE UNIVERSITATIS SCIENTIAE ET TECHNOLOGIAE HUAZHONG  年，卷(期)： 2006 35(5)  分类号： Q5  关键词： 蛋白质组   双向电泳   固相pH梯度   MOLT-4细胞  

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