鹧鸪茶ISSR-PCR反应体系优化的研究
通过单因素试验研究了大戟科野桐属植物鹧鸪茶ISSR-PCR反应体系中的主要影响因子.经过优化实验,建立了一套稳定的鹧鸪茶ISSR-PCR反应体系:10×buffer 2.5μL,1.5～3.0 mmol·L-1MgCl2,50～300 μmol·L-1dNTPs,Taq酶2.5～3.0U,引物0.3～0.6μmol·L-1,DNA模板80～160 ng.最后用无菌超纯水补足至25μL.PCR扩增程序为:94℃预变性4 min,然后按94℃变性40 s.52～54℃退火45 s,72℃延伸120 S,进行40个循环,最后72℃延伸8 min:16℃保存.该反应条件可应用于鹧鸪茶不同居群间亲缘关系和遗传多样性分析.
贾媛,JIA Yuan(海南大学,苦丁茶研究所,海南,海口570228)
刊 名： 海南师范大学学报（自然科学版） 英文刊名： JOURNAL OF HAINAN NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE) 年，卷(期)： 2009 22(2) 分类号： Q943 关键词： 鹧鸪荼 ISSR 影响因子 体系优化