应用红外荧光和加尾引物法进行向日葵SSR遗传分析中的多聚PCR和多聚凝胶

应用红外荧光和加尾引物法进行向日葵SSR遗传分析中的多聚PCR和多聚凝胶电泳的优化

在向日葵(Helianthus annuus L.)自交系SSR遗传分析中,为了提高SSR荧光分析效率、简化分析程序和降低研究费用,我们进行了多聚PCR和多聚凝胶电泳两项技术的优化研究.结果表明,优化多聚PCR和多聚凝胶电泳的影响因子(如逐步降低的退火温度的循环数、各个多聚位点引物浓度的平衡、PCR缓冲液浓度以及Taq DNA多聚酶的浓度等)可以收到更好的实验效果.基于以上的优化研究,系统地提出了一套优化的加尾引物法的策略.同时,提出了在多聚PCR和多聚凝胶电泳中常常遇到的技术难题的有效防止和解决的方法.

作 者： 张潞生 Vanessa BECQUET 李绍华 David ZHANG   作者单位： 张潞生(GEVES Le Magneraud, Laboratoire BioGEVES,B.P.52,F-17700 SURGERES,France;中国农业大学农学与生物技术学院,北京,100094)

Vanessa BECQUET,David ZHANG(GEVES Le Magneraud, Laboratoire BioGEVES,B.P.52,F-17700 SURGERES,France)

李绍华(中国科学院植物研究所,北京,100093) 

刊 名： 植物学报  ISTIC SCI 英文刊名： ACTA BOTANICA SINICA  年，卷(期)： 2003 45(11)  分类号： Q943  关键词： 简单重复序列(SSR)   加尾引物   多聚PCR   多聚凝胶电泳   向日葵   simple sequence repeat (SSR)   tailed primer   multiplex PCR   multiplex gel electrophoresis   sunflower