植物核蛋白提取方法

时间：2021-11-05 19:36:32 资料我要投稿

植物核蛋白提取方法

植物核蛋白提取试剂盒

植物核蛋白提取方法

产品组成：

产品组成规格植物核提取液A 植物核提取液B 蛋白酶抑制剂混合物

说明书

BB-3154-1 50 assays 25ml 10ml 250ul 一份

BB-3154-2 100 assays

50ml 20ml 500ul 一份

储存条件：

蛋白提取液，磷酸酶抑制剂2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。

有效期：

一年。

产品简介：

贝博植物核蛋白提取试剂盒提供配套试剂，适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

使用方法：

1. 提取液制备：每500ul预冷的.核蛋白提取液A和200ul提取液B中分别加入2ul

蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg植物组织样本剪碎，采用以下一种方

法处理：

i. 加入500ul提取液A后用匀浆机/匀浆器匀浆。

ii. 置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入500μl冷的提取液 A。 iii. 加入500ul提取液A直接置冰上研磨。

3. 高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，100×g力条件下离心1分钟。 4. 收集上清，弃沉淀。

5. 将上清在4℃，800×g力条件下离心1分钟。 6. 弃上清，收集沉淀。

7. 在沉淀中加入200μl冷的提取液B，高速涡旋振荡15秒。 8. 置冰上40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。 9. 在4℃，16000×g条件下离心10分钟。

10. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。

①②

11. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。