紫花苜蓿几丁质酶基因MsChiⅣ克隆及序列分析
本研究根据截形苜蓿(Medicago truncatula)根部的几丁质酶基因保守序列(GenBank登录号:AF167328)设计引物,通过RT-PCR直接扩增的方法得到了紫花苜蓿(Medicago Sativa L.)根部几丁质酶基因保守序列.根据得到的保守序列设计3'端和5'端特异引物,分别从3'端和5'端扩增延长该片段,最后通过序列拼接获得紫花苜蓿根部一种几丁质酶基因的全长cDNA序列,命名为MsChiⅣ(GenBank登录号:FJ487629).MsChiⅣ基因全长为1 025 bp,开放性阅读框全长为849 bp,编码282个氨基酸,分子量为30.5 kD,预测等电点为4.66,其结构包括信号肽、几丁质结合区、糖苷水解酶区,为Ⅳ类几丁质酶,属于几丁质酶第19家族,在氨基酸水平上与截形苜蓿几丁质酶蛋白同源性最高,达到98%.蛋白结构分析表明该基因编码蛋白为非跨膜蛋白,存在于细胞质中.
作 者： 王步云 李聪 王涌鑫 关宁 苗丽宏 Wang Buyun Li Cong Wang Yongxin Guan Ning Miao Lihong 作者单位： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,牧草遗传育种研究室,北京,100193 刊 名： 分子植物育种 英文刊名： MOLECULAR PLANT BREEDING 年，卷(期)： 2009 7(2) 分类号： S6 关键词： 几丁质酶基因 紫花苜蓿 克隆 分析