大肠杆菌中高效表达rhBMP-4的探讨及初步活性测定
目的:在大肠杆菌中表达具有生物活性的rhBMP-BMP-4.方法:在不改变氨基酸序列的前提下,以全基因合成的方式对人BMP-4成熟肽基因全长进行定点突变,将之重组入pET-3c表达载体并转化至大肠杆菌BL21(DE)plysS.IPTG诱导和包涵体复性后,利用C2C12细胞横向成骨细胞分化实验以及小鼠肌袋异位骨形成实验检测其活性.结果:获得0.348kb的BMP-4 DNA序列,表达的目的蛋白主要以包涵体的形式存在.经纯化及复性后,体内与体外的活性检测表明rhBMP-4有良好的诱骨生成活性.结论:该方案能够实现rhBMP-4在大肠杆菌中的高效表达.
作 者： 高思红 汪炬 董群伟 刘侃 刘雪婷 洪岸 谢秋玲 孙奋勇 GAO Si-hong WANG Ju DONG Que-wei LIU Kan LIU Xue-ting HONG An XIE Qiu-ling SUN Fen-yong 作者单位： 高思红,汪炬,刘侃,刘雪婷,洪岸,谢秋玲,孙奋勇,GAO Si-hong,WANG Ju,LIU Kan,LIU Xue-ting,HONG An,XIE Qiu-ling,SUN Fen-yong(暨南大学生物工程研究所,广州,510632)董群伟,DONG Que-wei(广东药学院附属第一医院骨科,广州,510632)
刊 名： 中国生物工程杂志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 26(3) 分类号： Q81 关键词： rhBMP-4 定点突变 包涵 体活性