HBcAg和HBsAg前S1表位肽融合蛋白的表达研究
构建、表达并纯化了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白BTcs1,为开发新型HBV治疗和预防性疫苗提供实验依据.利用DNA重组技术,构建了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表达质粒pBTcs1,在大肠杆菌(HB101)中进行表达,用蔗糖密度梯度超速离心对表达产物BTcs1进行纯化,用SDS-PAGE、SEC、Western-blot和电镜进行鉴定.结果表明成功构建了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表达质粒pBTcs1,BTcs1的表达量为20～25mg/L,DOT-BLOT结果显示BTcs1主要分布在30%～50%蔗糖介质中,SDS-PAGE和SEC结果显示蛋白纯度＞95%,Western-blot结果显示BTcs1可以与抗HBcAg抗体和抗HBsAg前S1抗体特异杂交,显色条带在约28kDa处,电镜分析表明BTcs1可以自主组装成病毒样颗粒(VLP),直径约为30～34nm.为进一步探讨BTcs1的功能及应用奠定了基础.
