真核表达质粒PcDNA3.1(+)-带有Vasostatin自身信号肽的Calreticulin(120～180 aa)的构建及其在COS-7细胞中的表达
目的构建真核表达质粒PcDNA3.1(+)-带有Vasostatin自身信号肽的Calreticulin(120～180 aa)并了解其在真核细胞内的表达.方法将带有Vasostatin自身信号肽的Calreticulin(120～180 aa)的RT-PCR产物克隆至pcDNA31(+)真核表达载体上,经酶切鉴定及测序分析证明构建成功后,以脂质体介导法转染真核细胞COS-7,并行Western法检测.结果成功构建了真核表达质粒PcDNA3.1(+)-带有Vasostatin自身信号肽的Calreticulin(120～180 aa),将之转染体外的真核COS-7细胞后,在其上清液中,检测到目的蛋白质.结论该构建的质粒可在真核细胞中表达目的蛋白质,这为基因治疗视网膜新生血管类病奠定了一定基础.
作 者： 刘建巨 吴雅臻 李光宇 范斌 作者单位： 吉林大学第二医院眼科医院,吉林,长春,130041 刊 名： 中国老年学杂志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY 年，卷(期)： 2006 26(2) 分类号： Q78 R318.12 关键词： Calreticulin(120～180aa) COS-7细胞 基因克隆 真核表达