大鼠CD40基因RNA干扰真核表达载体的构建及鉴定
目的:构建靶向大鼠CD40基因小分子干扰RNA(siRNA)真核细胞表达载体.方法:利用Ambion公司的网上设计工具,设计2个靶向CD40基因的发夹状siRNA,通过化学合成的方法合成2对分别互补的寡核苷酸链,退火后将双链DNA片段连接至pSilencer4.1-CMV neo vector的多克隆位点,转化扩增提取质粒,对重组质粒进行BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定.结果:经酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定,目的片段与pSilencer4.1-CMV neo vector连接正确,靶向大鼠CD40基因的siRNA重组表达质粒构建成功.结论:成功构建了大鼠CD40基因的RNA干扰真核表达载体pSilencer4.1-CMV-CD40.1和pSilencer4.1-CMV-CD40.2,为进一步研究CD40基因在同种器官移植排斥反应中的作用奠定基础.
作 者： 王楠 马庆久 鲁建国 何显力 邹爱民 李坤 WANG Nan MA Qing-jiu LU Jian-guo HE Xian-li ZOU Ai-min LI Kun 作者单位： 王楠,马庆久,鲁建国,何显力,WANG Nan,MA Qing-jiu,LU Jian-guo,HE Xian-li(第四军医大学唐都医院普通外科,陕西西安,710038)邹爱民,李坤,ZOU Ai-min,LI Kun(第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西西安,710038)
刊 名： 医学研究生学报 ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATES 年，卷(期)： 2008 21(3) 分类号： Q782 关键词： RNA干扰 CD40 重组载体