人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究

人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究

目的 克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽,检测其生物活性.方法 人工合成人内皮抑素1～30位氨基酸(30肽,序列25～31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,几丁质亲和层析树脂一步纯化30肽.通过MTT法、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验、小鼠体内抑瘤实验比较30肽和内皮抑素抗肿瘤活性.结果 MTT证实30肽体外对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、胃癌7901细胞(SGC-7901)半数抑制浓度IC50为36 μg/ml、47μg/ml,显著低于内皮抑素IC50179μg/ml、202 μg/ml.CAM实验中30肽对血管的抑制作用更强.30肽在小鼠体内抑瘤率47.8%,效果优于内皮抑素28.7%.结论 30肽具有更强抗肿瘤活性,有可能成为治疗肿瘤的一种新药物.

作 者： 李丹 刘兴汉 赵炜明 李冀宏 马洪星 张宇雯 栗亚 LI Dan LIU Xinghan ZHAO Weiming LI Jihong MA Hongxing ZHANG Yuwen LI Ya   作者单位： 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室,黑龙江省生物医药工程重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地,哈尔滨市,150081  刊 名： 医学分子生物学杂志  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF MEDICAL MOLECULAR BIOLOGY  年，卷(期)： 2007 4(6)  分类号： Q78  关键词： 内皮抑素   RGD序列   克隆   基因表达   抗肿瘤活性