体外培养人树突状细胞分化成熟特性分析
目的利用人脐血CD34+干细胞诱导分化树突状细胞(DC),并对DC分化发育过程的生物学特性进行鉴定和分析.方法通过SCF、GM-CSF、TGF-β1、Flt-3L及TNF-α体外培养体系,从脐血CD34+造血干细胞中诱导扩增获得DC.采用倒置显微镜和电镜观察DC形态学特征,流式细胞仪检测DC细胞表型及胞内活性氧(ROS)水平,MTT比色法检测DC刺激同种异体T细胞增殖能力;ELISA法检测DC培养上清液中IL-12含量.结果CD34+细胞培养5至7 d,细胞呈现DC典型树突状形态,处未成熟状态,再经TNF-α诱导及继续培养至14 d,DC发育成熟.未成熟DC表达模式识别受体CD209(DC-SIGN),且胞内蓄积适量ROS,具备了细胞吞噬能力.成熟DC除仍高表达DC-SIGN,其表面黏附共刺激分子CDllc、CD54、CD83、CD80、CD86表达上调,细胞因子IL-12分泌增加,且具明显的体外刺激T细胞增殖能力,符合于抗原递呈细胞特征.此外,未成熟和成熟DC基本不表达黏附分子P-、E-选择素,但未成熟和成熟DC分别高表达和低表达L-选择素.结论建立人DC体外模型及其分化发育生物学特性分析,为进一步研究DC功能,以及利用DC调控免疫应答用于疾病防治提供了基础.
作 者： 张玉梅 孙桂芝 周同 赵亚鹏 张雁云 张冬青 陈楠 作者单位： 张玉梅,孙桂芝,周同,赵亚鹏,陈楠(200025,上海,上海交通大学医学院瑞金医院肾内科)张雁云,张冬青(上海交通大学医学院上海市免疫学研究所)
刊 名： 中国微循环 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF CHINESE MICROCIRCULATION 年，卷(期)： 2006 10(1) 分类号： Q25 关键词： 树突状细胞 分化 生物学特性