木瓜凝乳蛋白酶的单甲氧基聚乙二醇化学修饰及其对酶活力和抗原性的影响
目的研究木瓜凝乳蛋白酶(Cp)的单甲氧基聚乙二醇(mPEG)化学修饰对酶活力和抗原性的影响,为该酶的修饰改性提供实验依据.方法在底物保护和无底物保护下,分别以单甲氧基聚乙二醇的两种活化产物mPEG1和mPEG2对木瓜凝乳蛋白酶进行共价修饰,以三硝基苯磺酸法测定各修饰酶的平均氨基修饰度;以大分子酪蛋白和小分子BAEE为底物分别测定各修饰酶的酶活性;以ELISA法检测各修饰酶的抗原性.结果①mpEG1和mPEG2修饰均能降低及消除酶的抗原性,其中mPEG2的效果更为明显.②二者的化学修饰均使酶活力有所下降,其中mPEG1修饰酶的酶活力(分别以酪蛋白和BAEE为作用底物,下同)均高于mPEG2修饰酶的酶活力(尤其是当底物为大分子蛋白质时).③底物保护下的修饰酶酶活力均显著高于无底物保护的酶活力.结论以mPEG1为修饰剂,在底物保护下的Cp修饰能在消除抗原性的同时,获得仍具较高酶活力的修饰酶.
房师松,Fang Shi-song(深圳市疾病预防控制中心)
崔堂兵,郭勇,Cui Tang-bing,Guo Yong(华南理工大学生物科学与工程学院)
刊 名： 卫生研究 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH 年，卷(期)： 2006 35(3) 分类号： Q814 Q556.9 R446.6 关键词： 木瓜凝乳蛋白酶 单甲氧基聚乙二醇(mPEG) 化学修饰 酶活力 抗原性