表达人胰高血糖素样肽前药工程菌遗传稳定性

表达人胰高血糖素样肽前药工程菌遗传稳定性

通过传代培养的方法,研究高表达重组人胰高血糖素样肽前药(Pro-rhGLPs)的工程菌E.coli BL21(DE3)/pET41a(+)-hGLPs的遗传稳定性,观察菌体和菌落形态,比较在有无选择压力下的质粒稳定性,酶切和测序鉴定重组基因片断的正确性,SDS-PAGE电泳证实重组蛋白质的表达量的稳定性,在C57BL/6小鼠上进行葡萄糖耐量实验检测重组蛋白生物学活性.结果显示:此工程菌连续传代过程中,保持大肠杆菌的典型特征,各代质粒的酶切鉴定和测序正确,重组蛋白表达水平及生物活性也无显著差异.因此,工程菌E.coli BL21(DE3)/pET41a(+)-hGLPs具有良好的遗传稳定性.

作 者： 周颖 马雪 侯征 薛小燕 陈瑛瑛 罗晓星 ZHOU Ying MA Xue HOU Zheng XUE Xiao-yan CHEN Ying-ying LUO Xiao-xing   作者单位： 第四军医大学,药学系药理学教研室,西安,710032  刊 名： 生物加工过程  ISTIC 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING  年，卷(期)： 2010 8(2)  分类号： Q78  关键词： 人胰高血糖素样肽   遗传稳定性   前药   hGLP-1   genetic stability   prodrug  

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