诱骗受体DcR3的基因构建、表达及特异性鉴定

诱骗受体DcR3的基因构建、表达及特异性鉴定

目的: 构建适于原核表达的人诱骗受体DcR3基因, 并进行重组蛋白的表达纯化及特异性鉴定.方法: 查得人DcR3 Cdna全序列, 将其分段设计引物, 通过重叠PCR获得DcR3基因.构建Pet-22b(+)/DcR3表达载体, 转化大肠杆菌Rosseta-gami, IPTG诱导表达, Ni柱纯化.采用ELISA进行特异性鉴定.结果: 通过重叠PCR获得了编码正确氨基酸序列的目的基因.目的蛋白以包涵体的形式表达, 表达量占菌体总蛋白的30%以上.纯化后, 蛋白纯度达95%以上.ELISA结果表明所纯化的蛋白可与抗DcR3抗体发生特异结合.结论: 诱骗受体DcR3基因的成功构建、表达及纯化, 为进一步的功能研究奠定了基础.

作 者： 李文珠 陶惠然 颜江华 张长弓 苏金华 王阶平 杨桂旺 庄国洪   作者单位： 李文珠,王阶平,杨桂旺,庄国洪(厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005)

陶惠然,颜江华,张长弓,苏金华(厦门大学医学院抗癌研究中心,福建,厦门,361005) 

刊 名： 细胞与分子免疫学杂志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(2)  分类号： Q786  关键词： DcR3   基因构建   基因表达  

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