用于筛选COPS3相互作用蛋白酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-COPS3的构建及鉴定
目的 用COP岛基因片段构建酵母双杂交GAL4系统的诱饵载体pGBKT7-COPS3,并检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用.方法 运用RT-PCR技术从骨肉瘤细胞系SOSP-9607中扩增出COPS3基因片段,克隆入pUC19质粒,经测序正确后,插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母菌AH109,检测其表达产物在酵母细胞中对报告基因有无激活作用.结果 成功获得COPS3基因片段,其表达蛋白对酵母菌AH109无毒性,对报告基因亦无激活作用.结论 可以利用酵母双杂交GAL4系统来研究与COPS3相互作用蛋白.
作 者： 苏海川 赵玉红 陈军 张伟 李陕区 作者单位： 苏海川,陈军,李陕区(第四军医大学唐都医院中心实验室,西安,710038)赵玉红(第四军医大学基础部免疫学教研室)
张伟(第四军医大学基础部微生物学教研室)
刊 名： 山西医科大学学报 ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 2007 38(7) 分类号： Q781 关键词： 基因,COPS3 酵母双杂交系统 报告基因