人骨髓间充质干细胞体外培养及鉴定
目的:体外分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞(hBMSC).方法:利用密度梯度离心法分离出人骨髓单个核细胞(MNC),通过贴壁筛选法建立hBMSC的体外培养体系,并通过一系列检测方法对所培养的细胞进行鉴定.结果:细胞主要呈"成纤维样",但体积较大、形状不规则、细胞质突起多,细胞核大而疏松,核仁明显.流式细胞仪检测:CD34阳性率为2.09%、CD29阳性率为94.46%;CD54及CD105表达阳性.细胞周期及透射电镜检测提示细胞处于相对原始状态.免疫细胞化学染色显示:CD14、CD45、胶原蛋白Ⅱ呈阴性;CD106、CD166、纤维连接蛋白、波形蛋白及胶原纤维酸性蛋白呈阳性.细胞化学染色:糖原染色呈强阳性;碱性磷酸酶染色呈阴性.通过诱导分化培养可诱导出成骨细胞.结论:成功建立了稳定的hBMSC体外培养体系,按照此培养体系进行培养可获得hBMSC.hBMSC可传代培养,但在培养过程中细胞逐渐出现老化现象,且不能冻存.
作 者： 梁雪 粟永萍 孔佩艳 陈幸华 彭贤贵 徐辉 曾东风 艾国平 LIANG Xue SU Yong-ping KONG Pei-yan CHEN Xing-hua PENG Xian-gui XU Hui ZENG Dong-feng AI Guo-ping 作者单位： 梁雪,孔佩艳,陈幸华,彭贤贵,曾东风,LIANG Xue,KONG Pei-yan,CHEN Xing-hua,PENG Xian-gui,ZENG Dong-feng(第三军医大学附属新桥医院血液科,重庆,400037)粟永萍,徐辉,艾国平,SU Yong-ping,XU Hui,AI Guo-ping(预防医学院解放军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038)
刊 名： 医学研究生学报 ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATES 年，卷(期)： 2007 20(5) 分类号： Q813.11 关键词： 人骨髓间充质干细胞 造血微环境 细胞培养