腺病毒介导的白介素10基因体外转导大鼠β2m-/Thy-1+骨髓源性肝干细胞
目的 研究腺病毒介导的白介素10(interleukin 10,IL-10)基因(AdlL-10)体外转导β2m-/Thy-1+骨髓源性肝干细胞(bone marrow-derived liver stem cell,BDLSC)的可行性.方法 利用免疫磁珠细胞分选(magnetic bead cell sorting,MACS)方法分选大鼠β2m-/Thy-1+BDLSC,RT-PCR法鉴定其肝相关性表型的表达.AdIL-10转导BDLSC,根据腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达率测定转导效率,采用RT-PCR法和ELISA法分别检测IL-10的基因表达和蛋白分泌水平.采用MTT法和免疫荧光染色法分别检测腺病毒转导对BDLSC增殖能力和肝细胞样表型白蛋白(albumin,ALB)表达的影响.结果 MASC法能成功分选纯化BDLSC,其在基因水平表达肝细胞样表型.AdIL-10转导BDLSC的效率呈剂量依赖性,最佳转染复数为500 pfu/eell.AdIL-10修饰BDLSC高表达IL10基因,且持续高浓度分泌IL-10蛋白至胞外.AdIL-10转导72 h后,BDLSC仍保持正常的增殖能力和ALB表达.结论 BDLSC是AdIL-10转导的适宜载体,为AdIL-10修饰BDLSC这一新型结合方式用于慢性肝病的治疗奠定了实践基础.
作 者： 兰玲 陈源文 孙超 孙巧玲 李定国 LAN Ling CHEN Yuanwen SUN Chao SUN Qiaoling LI Dingguo 作者单位： 上海交通大学医学院,新华医院消化内科,上海,200092 刊 名： 胃肠病学和肝病学杂志 ISTIC 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY 年，卷(期)： 2008 17(1) 分类号： Q813 Q7.82 关键词： 骨髓源性肝干细胞 腺病毒载体 白介素10 基因转导