用PCR法检测苏云金杆菌的溶原性噬菌体
根据苏云金杆菌 (Bacillus thuringiensis, B.t) 溶原性噬菌体GIL01(GenBank Accession Number: AJ536703) 的同源序列设计一对引物,用35株B.t标准菌株和生产菌株MZ1(血清型H3a3b)的过夜培养物作模板, 结果有16株菌株包括MZ1能扩增出大小约为750 bp的预期产物,推测这16株菌为溶原菌.MZ1菌株的过夜培养液与指示菌ZK1(血清型H25)混匀并在双层琼脂上培养12 h后出现了滴度为2×107 pfu的噬菌斑,从而证明生产菌株MZ1确为溶原菌;又以GIL01同源性较高的其它四个基因设计引物,分别以MZ1的培养物及其溶原性噬菌体基因组为模板进行PCR扩增,结果两者得到几乎一致的带型,进一步证明了生产菌株MZ1为溶原菌,说明利用PCR法检测鉴定苏云金杆菌的溶原性是可行的.比较指示菌方法、直接电镜法和DNA鉴定法,PCR法快速简便,对B.t生产上快速检测其溶原性噬菌体有实用意义.
作 者： 廖威 宋少云 陈维春 薛清华 孙钒 艾云灿 庞义 LIAO Wei SONG Shao-yun CHEN Wei-chun XUE Qing-hua SUN Fan AI Yun-can PANG Yi 作者单位： 廖威,LIAO Wei(中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广东,广州510275;广西职业技术学院,广西,南宁,530226)宋少云,陈维春,薛清华,孙钒,艾云灿,庞义,SONG Shao-yun,CHEN Wei-chun,XUE Qing-hua,SUN Fan,AI Yun-can,PANG Yi(中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广东,广州,510275)
刊 名： 中山大学学报（自然科学版） ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI 年，卷(期)： 2006 45(4) 分类号： Q936 Q939 S476 关键词： 苏云金杆菌 溶原性 噬菌体