重组菌转化4-氯乙酰乙酸乙酯为R-(+)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的研究

重组菌转化4-氯乙酰乙酸乙酯为R-(+)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的研究

通过醛基还原酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶的基因构建重组大肠杆菌,并考察加入诱导剂的时间、浓度和诱导时间对酶活的影响,优化重组大肠杆菌的表达.实验结果表明,重组大肠杆菌在对数生长中期加入0.4 mmol/L的诱导剂,在32 ℃下培养8 h,酶活可达到5.27 U/mg-protein.以重组大肠杆菌为催化剂,研究4-氯乙酰乙酸乙酯转化为R-(+)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的反应,发现利用基因重组技术构建的大肠杆菌,可使醛基还原酶和葡萄糖脱氢酶共同表达,实现辅酶再生,提高产物对映体过量值.在转化反应过程中,随着温度升高,产物收率先增加;当转化温度在32 ℃以上,收率反而会下降.底物对反应有抑制作用,采用分批加入底物的方式可以减少抑制作用,提高产物收率.

作 者： 李静 林建平 徐志南 谭天伟 岑沛霖 Li Jing Lin Jianping Xu Zhinan Tan Tianwei Cen Peilin   作者单位： 李静,林建平,徐志南,岑沛霖,Li Jing,Lin Jianping,Xu Zhinan,Cen Peilin(浙江大学材料与化学工程学院,浙江,杭州,310027)

谭天伟,Tan Tianwei(北京化工大学生命科学与技术学院,北京,100029) 

刊 名： 化学反应工程与工艺  ISTIC PKU 英文刊名： CHEMICAL REACTION ENGINEERING AND TECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(4)  分类号： Q781 Q554 Q643  关键词： 不对称还原   4-氯乙酰乙酸乙酯   R-(+)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯