人白细胞介素-4基因在家蚕杆状病毒表达系统中的表达
采用RT-PCR法从经LPS诱导刺激的人外周血淋巴细胞中克隆了人白细胞介素-4 (human interleukin-4, hIL-4) 基因.为高效表达hIL-4,促进其临床应用,将hIL-4插入家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK8中,构建重组载体pBacPAK-hIL-4,并与线性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕BmN细胞,获得重组病毒BacPAK-hIL-4.将重组病毒感染家蚕5龄幼虫和蚕蛹 (1×105 PFU/头),表达产物以ELISA 、SDS-PAGE和Western blotting方法检测,用活化的人外周血T淋巴细胞测定表达产物体外生物活性.ELISA法结果表明hIL-4在感染病毒后96 h 的蚕血淋巴和120 h 的蚕蛹中表达量最高,分别达到2.3 μg/ mL蚕血淋巴和10.2 μg/ mL体液;SDS-PAGE、Western blotting分析表明表达产物分子量约20 kD;表达产物对活化的T淋巴细胞增殖具有明显促进作用.
作 者： 陈蔚青 史锋 朱成钢 申屠超 CHEN Wei-Qing SHI Feng ZHU Cheng-Gang SHEN Tu-Chao 作者单位： 陈蔚青,申屠超,CHEN Wei-Qing,SHEN Tu-Chao(浙江树人大学生物与环境工程学院,杭州,310015)史锋,朱成钢,SHI Feng,ZHU Cheng-Gang(浙江大学生物化学研究所,杭州,310029)
刊 名： 蚕业科学 ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SERICOLOGICA SINICA 年，卷(期)： 2006 32(4) 分类号： Q78 S881.2 关键词： 人白细胞介素-4基因 克隆 表达 家蚕杆状病毒表达载体系统