猪链球菌2型溶血素基因与38KDa蛋白基因克隆及联合表达
目的:研究有效的猪链球菌病疫苗.方法:以四川株猪链球菌2型基因组DNA为模板分别扩增溶血素基因和38KDa基因主要功能区基因;并经连接、克隆及酶切鉴定.分别构建原核表达栽体pET32a-Sly、pET32a-38KDa,提取阳性克隆质粒分别进行双酶切并纯化,通过PCR串联两片断,将目的片断定向克隆到表达载体pET32a中,经测序正确后,重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达.结果:重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量约为60Ku的重组蛋白,表达产物经纯化后,免疫印迹法(Western-blotting)证实该重组蛋白可以与SS2阳性血清发生特异性反应.结论:本研究为重组蛋白的免疫保护应用奠定基础.
作 者： 王华 王君玮 陈义平 赵永刚 徐天刚 赵云玲 张维 王志亮 WANG Hua WANG Jun-wei CHEN Yi-ping ZHAO yong-gang XU Tian-gang ZHAO Yun-ling ZHANG Wei WANG Zhi-liang 作者单位： 王华,WANG Hua(中国动物卫生流行病学中心ABSL-3实验室,青岛,266114;扬州大学兽医学院,扬州,225009)王君玮,陈义平,赵永刚,徐天刚,赵云玲,张维,王志亮,WANG Jun-wei,CHEN Yi-ping,ZHAO yong-gang,XU Tian-gang,ZHAO Yun-ling,ZHANG Wei,WANG Zhi-liang(中国动物卫生流行病学中心ABSL-3实验室,青岛,266114)
刊 名： 现代生物医学进展 ISTIC 英文刊名： PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年，卷(期)： 2007 7(7) 分类号： Q813 关键词： 猪链球菌2型 溶血素 38KDa蛋白 克隆 表达