CD147 shRNA质粒表达载体的构建及鉴定
目的 构建表达细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147,EMMPRIN)基因序列特异性的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)载体.方法 根据CD147基因序列及shRNA设计原则,化学合成两段编码短发夹RNA寡核苷酸序列,将其定向克隆到pGenesil-1.1质粒表达载体中,重组构建RNAi质粒,并对重组质粒进行酶切分析.结果 限制性内切酶Eeo31I和SacI酶切显示设计合成的shRNA编码序列被成功插入pGenesil-1.1质粒载体中,酶切结果证实插入片段与设计序列完全一致,成功构建针对基因CD147的shRNA质粒表达载体.结论 成功构建人CD147基因重组载体,为研究CD147蛋白的生物学效应和骨肉瘤的治疗提供实验依据.
作 者： 逯强 吕刚 王岩峰 薛义军 作者单位： 逯强(中国医科大学附属第一医院骨科,辽宁沈阳,110001;华北煤炭医学院附属骨科医院,河北唐山,063000)吕刚,王岩峰(中国医科大学附属第一医院骨科,辽宁沈阳,110001)
薛义军(中国医科大学附属第一医院泌尿外科,辽宁沈阳,110001)
刊 名： 解剖科学进展 ISTIC 英文刊名： PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES 年，卷(期)： 2010 16(3) 分类号： Q782 R738 关键词： CD147 shRNA 质粒 载体 RNAi