高纯度木瓜蛋白酶的分离纯化和性质研究

高纯度木瓜蛋白酶的分离纯化和性质研究

目的 建立木瓜蛋白酶的分离纯化工艺路径.方法 采用初步采集处理,20%,40%硫酸铵分级沉淀、SP-sephadex C50柱色谱、羟基磷灰石柱色谱,从番木瓜乳汁中分离纯化木瓜蛋白酶.结果 获得比活为1 184 U/mg的纯酶,活力回收率为55.79%,纯化的酶经SDS-PAGE呈单一条带,高效液相色谱呈单一条带,纯度达到99.31%.该酶耐高温,最适pH值为7.2,对酪蛋白的动力学常数(Km)为3.5×10-5 mol/L.结论 应用此方法成功纯化了高纯度的木瓜蛋白酶.

作 者： 王丽彬 张弢 王旻 WANG Li-bin ZHANG Tao WANG Min   作者单位： 中国药科大学,生命科学与技术学院,江苏,南京,210009  刊 名： 中国生化药物杂志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS  年，卷(期)： 2006 27(3)  分类号： Q556+.9 R284.2  关键词： 木瓜蛋白酶   木瓜   纯化   酶学性质