截短型细胞毒素Gelonin的分子构象和生物活性
为了探索免疫络合物中具杀伤靶细胞的毒素,gelonin的结构与功能的关系,根据化学合成的gelonin基因序列和3维分子构象设计了N端区Gly,Leu,Asp和/或C端区Asp,Lys,Asp,Pro,Lys缺失的gelonin.以重组质粒pE-gel为模板,在相应引物存在下,用PCR法获得5'端区和/或3'端区碱基序列缺失的gelonin基因片段.经克隆、表达和纯化得到3种截短型gelonin(G-N3、G-C5、G-N3C5).CD谱和荧光谱表明,完整型gelonin(G-O)与截短型gelonin的分子构象有明显的差异.它们的构象变化与类DNase活性和抑制肿瘤细胞生长的能力均为G-O≥G-N3＞G-C5＞G-N3C5.结果再一次证明了具有α+β型结构蛋白,gelonin的构象与生物活性的一致性.
郭晨云,GUO Chen-Yun(中国科学院上海药物研究所,上海,201203)
郭素堂,史天良,GUO Su-Tang,SHI Tian-Liang(山西省肿瘤研究所,太原,030013)
刊 名： 中国生物化学与分子生物学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(5) 分类号： Q78 关键词： 截短型gelonin 纯化 构象 类DNase活性 肿瘤细胞抑制