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基因重组大肠杆菌表达截短型pZP3β的发酵条件优化
目的:对已构建好的表达pZP3β蛋白(pZP130)工程菌的培养条件进行优化,通过在5 L罐中发酵和Ni柱纯化,以期获取较大量目的产物.方法:在摇瓶中改变不同的培养及诱导条件,比较工程菌的生长和目的蛋白的表达,优化发酵条件;并在5 L发酵罐中进行发酵,获得菌体,破碎后进行Ni柱纯化.结果:优化的发酵条件是:10%的接种量,加入2%甘油的培养基培养菌体3 h后加入0.5 mmol/L IPTG,诱导4 h后收样.在5 L发酵罐中发酵,获得菌体量36g/L,经Ni柱纯化,获得蛋白粗制品33 mg/L发酵液.结论:截短型pZP3β蛋白可以在E coli中获得较高表达,并且可以通过发酵和Ni柱纯化得到较大量的蛋白,这有助于pZP的深入研究和应用.
作 者: 谢秋玲 陈小佳 朱伟杰 赵振云 吴建虹 徐万祥 刘侃 李菁 Qiu-ling XIE Xiao-jia CHEN Wei-jie ZHU Zhen-yun ZHAO Jian-hong WU Wan-xiang XU Kan LIU Jing LI 作者单位: 谢秋玲,吴建虹,刘侃,Qiu-ling XIE,Jian-hong WU,Kan LIU(暨南大学生物工程研究所,广州,510632)陈小佳,Xiao-jia CHEN(广东省生物工程药物重点实验室,广州,510632)
朱伟杰,Wei-jie ZHU(暨南大学生殖免疫研究中心,广州,510632)
赵振云,Zhen-yun ZHAO(暨南大学生物系,广州,510632)
徐万祥,Wan-xiang XU(上海市计划生育科学研究所,上海,200032)
李菁,Jing LI(暨南大学医学院,广州,510632)
刊 名: 生殖与避孕 ISTIC PKU 英文刊名: REPRODUCTION AND CONTRACEPTION 年,卷(期): 2006 26(4) 分类号: Q819 关键词: 截短型 猪卵透明带-3β 大肠杆菌 表达 发酵【基因重组大肠杆菌表达截短型pZP3β的发酵条件优化】相关文章:
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