噬菌体抗体库固相筛选条件的初步研究

噬菌体抗体库固相筛选条件的初步研究

目的:探讨噬菌体抗体库的固相筛选条件,为筛选方案的设计提供实验依据.方法:利用多种针对HEV NE2蛋白的特异性噬菌体人源抗体和非特异性噬菌体人源抗体,对噬菌体抗体与抗原的结合时间、抗原包被的浓度、洗涤强度和洗脱方式等多种筛选的条件进行初步探索.结果:阳性噬菌体抗体与抗原反应1 min,就可较好结合,洗涤次数为20～30次、洗涤液的pH为5时,筛选得到的阳性率最高.包被抗原的浓度对筛选的阳性率没有明显影响,用10 mg/L抗原竞争洗脱60 min,可得到较高的阳性率.结论:噬菌体抗体库的筛选是一个非常复杂的过程,其中的各个条件之间有着密切的联系,应该根据具体情况进行调整.

作 者： 王明桥 罗文新 陈瑛炜 袁权 王晋 张军 夏宁邵 WANG Ming-qiao LUO Wen-xin CHEN Ying-wei YUAN Quan WANG Jin ZHANG Jun XIA Ning-shao   作者单位： 福建省医学分子病毒学研究中心,厦门大学教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室,福建,厦门,361005  刊 名： 细胞与分子免疫学杂志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(5)  分类号： Q782  关键词： 噬菌体抗体库   固相筛选   筛选条件  

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