热应激对剑尾鱼HSP70家族两成员基因表达的影响
采用RT-PCR方法扩增实验动物剑尾鱼(Xiphophorus helleri)纯系RR-B的HSP70家族两个成员的cDNA片段,并将其克隆到PMD18-T载体中测序,将测序结果与GenBank中的核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行同源性比较.同时利用RT-PCR半定量方法研究热应激时两个成员在剑尾鱼组织中的表达.通过克隆获得了剑尾鱼的HSP70家族两个新成员的cDNA片段,两序列均包含HSP70家族的特征性签名序列和热休克蛋白的定位序列;通过对克隆片段与已发表的青鳉(Oryzias latipes)等鱼类HSP70的核苷酸序列和其编码的氨基酸序列同源性比较,发现核苷酸序列同源性较高,成员一和成员二分别为85%～89%和82%～99%;氨基酸序列同源性更高,成员一和成员二分别为97%～99%和93%～99%.一般条件下,两成员在剑尾鱼肝脏、脾脏、肾脏和心脏中不表达,但热应激能刺激成员一在剑尾鱼脾脏中表达,成员二在肝脏、脾脏、肾脏和心脏中强烈表达,并可能在参与热应激保护方面起更大作用.
作 者： 万文菊 石存斌 王纪亭 柴同杰 吴淑勤 WAN Wen-ju SHI Cun-bin WANG Ji-ting CHAI Tong-jie WU Shu-qin 作者单位： 万文菊,WAN Wen-ju(中国水产科学研究院,珠江水产研究所,广东,广州,510380;山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018;泰山医学院,山东,泰安,271000)石存斌,吴淑勤,SHI Cun-bin,WU Shu-qin(中国水产科学研究院,珠江水产研究所,广东,广州,510380)
王纪亭,柴同杰,WANG Ji-ting,CHAI Tong-jie(山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018)
刊 名： 中国水产科学 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FISHERY SCIENCES OF CHINA 年，卷(期)： 2006 13(6) 分类号： Q959.475 关键词： HSP70 热应激 剑尾鱼 克隆 基因表达