出血性大肠杆菌O157:H7的Tir与stx1/2B融合基因的构建和表达
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157:H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗具有很大优势.方法:构建表达tir和stxb的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stxB亚基基因72个氨基酸串联,构建pET28a-stx2b-Tir295-stx1b重组质拉,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达.结果:薄层扫描分析表明,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右.结论:由于该融合蛋白由Tir、stx1b和stx2b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(stx)的抗体,在EHEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值.
作 者： 张雪寒 何孔旺 卢维彩 俞正玉 茅爱华 刘亚栋 作者单位： 江苏省农业科学院,兽医研究所,江苏,南京,210014 刊 名： 内蒙古农业科技 英文刊名： INNER MONGOLIA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY 年，卷(期)： 2009 ""(3) 分类号： Q78 关键词： EHECl O157 H7 转位紧密素受体 志贺毒素 融合基因