甜槠ISSR-PCR反应体系的正交优化
对甜槠Castanopsis eyrei进行遗传多样性研究的过程中,为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果,利用正交设计对Mg2+,dNTP,引物,Taq酶,牛血清蛋白(BSA)和模板DNA等6种因素5个水平进行筛选和优化.确定甜槠ISSR-PCR最适宜反应体系为:10 μL反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol·L-1 Tris-HCl,pH 9.0,50 mmol·L-1 KCl,10 g·L-1 TritonX-100),1.7 mmol·L-1Mg2+,0.25 mmol·L-1 dNTP,8.34 nkat TaqDNA 聚合酶,1.5 g·L-1牛血清白蛋白,6 pmol引物,12 ng模板DNA.甜槠扩增时引物UBC846的最适退火温度为56.3 ℃.图2表1参23
作 者： 张文标 金则新 李钧敏 潘冠琼 ZHANG Wen-biao JIN Ze-xin LI Jun-min PAN Guan-qiong 作者单位： 张文标,ZHANG Wen-biao(西南师范大学,三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆,400715;台州学院,生态研究所,浙江,临海,317000)金则新,李钧敏,潘冠琼,JIN Ze-xin,LI Jun-min,PAN Guan-qiong(台州学院,生态研究所,浙江,临海,317000)
刊 名： 浙江林学院学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF ZHEJIANG FORESTRY COLLEGE 年，卷(期)： 2006 23(5) 分类号： Q946 S792.17 关键词： 植物学 ISSR-PCR 正交设计 优化 甜槠