藻胆蛋白ApcE缺失突变体的自催化重组研究
采用聚合酶链式反应(PCR)扩增出Anabaena.sp PCC7120别藻蓝蛋白ApcE(1-240)的一系列缺失突变体基因: apcE(14-240)、apcE(25-240)、apcE(63-240)、apcE(85-240)、apcE(121-240)、apcE(133-240)、apcE(187-240),在大肠杆菌中高效表达分别获得相对应的缺失突变体蛋白.对上述脱辅基蛋白与藻蓝胆素(PCB)的体外自催化重组进行了研究.结果表明:在含有4 mol/L尿素的磷酸钾缓冲体系中,ApcE(25-240)脱辅基蛋白可与藻蓝胆素体外重组实现共价连接,获得的色素蛋白质具有最大吸收峰(λmax＝656 nm)和荧光发射峰(λmax＝670 nm),其余6个缺失突变体蛋白仅能与藻蓝胆素非共价连接,不能发生自催化重组.该结果为进一步研究连接多肽ApcE的结构和功能提供了信息,具有重要意义.
甘春晖,周明,GAN Chun-hui,ZHOU Ming(华中科技大学环境科学与工程学院,武汉,430074)
赵开弘,ZHAO Kai-hong(华中科技大学生命科学与技术学院,武汉,430074;华中科技大学环境科学与工程学院,武汉,430074)
刊 名： 武汉理工大学学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY OF TECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 28(10) 分类号： Q754 关键词： 藻胆体 藻蓝胆素 ApcE 缺失突变体 体外重组 自催化连接