藻蓝蛋白裂合酶CpeS色氨酸定点诱变及体内重组功能研究

藻蓝蛋白裂合酶CpeS色氨酸定点诱变及体内重组功能研究

为了研究藻蓝蛋白β亚基Cys-84裂合酶CpeS结构与功能的关系以及色氨酸残基对于该酶功能的影响,构建了藻蓝蛋白β亚基Cys-84裂合酶CpeS的两个色氨酸突变体,分别为CpeS(W14I) 和CpeS(W75S).通过体内重组检测酶活性的变化,研究色氨酸残基的突变对裂合酶催化活性的影响.重组结果显示:突变体CpeS(W14I)的催化活性几乎完全丧失,为野生型的8%;突变体CpeS(W75S)的催化活性为野生型的76%.由此推测,第14位色氨酸可能是CpeS酶活性的必需氨基酸,其所处的位置可能是裂合酶CpeS的活性位点.

作 者： 张晓刚 周明 胡勋 赵开弘 ZHANG Xiao-Gang ZHOU Ming HU Xun ZHAO Kai-Hong   作者单位： 华中科技大学环境科学与工程学院,武汉,430074  刊 名： 武汉植物学研究  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF WUHAN BOTANICAL RESEARCH  年，卷(期)： 2006 24(3)  分类号： Q503 Q949.2  关键词： CpeS   定点诱变   体内重组   活性位点