以β-半乳糖苷酶为报告基因的原核启动子检测体系构建

以β-半乳糖苷酶为报告基因的原核启动子检测体系构建

目的:以β-半乳糖苷酶为报告基因构建原核启动子检测体系.方法:以由质粒 pDL 扩增获得的 bgaB 基因为报告基因,将其克隆到大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体 pBE2,构建成一个具有启动子活性检测功能的重组质粒pBEB.将组成型启动子P43和诱导型启动子Pcpac克隆入 pBEB,得到重组表达载体 pBEBP43 和 pBEBPapac,转化至大肠杆菌和枯草芽孢杆菌.结果:两种不同类型的启动子均能在大肠杆菌 BL21 和枯草芽孢杆菌 1A751 中启动 bgaB 基因的表达.结论:成功构建具有较为广泛适用性的原核启动子检测体系.

作 者： 陈坤 黎明 樊欣迎 路福平 CHEN Kun LI Ming FAN Xin-ying LU Fu-ping   作者单位： 天津市工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津,300457  刊 名： 生物技术  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 18(1)  分类号： Q786  关键词： β-半乳糖苷酶   启动子活性检测   大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体