一种新的高立体选择性羰基还原酶的性质及分离
从近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis CCTCC 203011)中分离得到了新的NADPH依赖型羰基还原酶.粗酶经硫铵分级沉淀、DEAE Sepharose离子交换层析、Phenyl-sepharose FF疏水层析、Blue Sepharose FF亲和层析后在SDS-PAGE上显示为单一条带,其酶蛋白的相对分子质量为30 Kd.该酶还原反应的最适Ph值为4.5,最适温度为35 ℃,Cu2+对羰基还原酶有强烈的抑制作用.该酶具有较高的底物专一性和立体选择性,对α-羟基苯乙酮和4-氯乙酰乙酸乙酯具有较高的不对称还原活力,其产物分别为(S)-苯基乙二醇和(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯,e.e值分别为100%和94.3%.因此该酶蛋白是不对称合成手性醇有效的生物催化剂之一.经LC-MASS-MASS分析得到了酶蛋白中一个肽段的氨基酸序列,通过比对发现该酶与假定蛋白(hypothetical protein CaO19.10414)具有一定的同源性.
作 者： 羊明 徐岩 穆晓清 肖荣 YANG Ming XU Yan MU Xiaoqing XIAO Rong 作者单位： 江南大学教育部工业生物技术重点实验室,江苏,无锡,214036 刊 名： 化工进展 ISTIC PKU 英文刊名： CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS 年，卷(期)： 2006 25(9) 分类号： Q814.1 关键词： 生物催化 羰基还原酶 分离纯化 (S)-苯基乙二醇 (R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯