PEP-1肽介导人Cu,Zn-SOD转导入人脐静脉内皮细胞
目的:构建原核表达载体pET15b-PEP-1-SOD1,观察表达的融合蛋白PEP-1-SOD1能否进入细胞. 方法:以pBluescript II SK-SOD1质粒为模板, PCR扩增SOD1 cDNA. 经酶切后分别构建原核表达载体pET15b-SOD1和pET15b-PEP-1-SOD1,分别转化大肠杆菌,表达SOD1和PEP-1-SOD1融合蛋白,将鉴定和纯化后的融合蛋白加入体外培养的人脐静脉内皮细胞. 结果:得到高纯度的、有活性的SOD1和PEP-1-SOD1融合蛋白. PEP-1-SOD1融合蛋白能高效地转导入体外培养的人脐静脉内皮细胞,并表现出剂量依赖性和时间依赖性的特点;一旦进入细胞,PEP-1-SOD1融合蛋白可以维持48 h. 结论: PEP-1-SOD1融合蛋白能高效地转导入体外培养的人脐静脉内皮细胞,为SOD1进入组织细胞内发挥治疗作用提供了实验基础.
作 者： 丁鹏 王家宁 黄永章 骆丽娜 邵芳 DING Peng WANG Jia-Ning HUANG Yong-Zhang LUO Li-Na SHAO Fang 作者单位： 丁鹏,DING Peng(郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所,湖北,十堰,442000;平顶山煤业集团总医院,河南,平顶山,467000)王家宁,黄永章,WANG Jia-Ning,HUANG Yong-Zhang(郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所,湖北,十堰,442000)
骆丽娜,邵芳,LUO Li-Na,SHAO Fang(平顶山煤业集团总医院,河南,平顶山,467000)
刊 名： 第四军医大学学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 2006 27(9) 分类号： Q78 关键词： 超氧化物歧化酶 原核表达 PEP-1肽 融合蛋白