用双特异探针技术定性定量分析微型原甲藻

用双特异探针技术定性定量分析微型原甲藻

针对微型原甲藻核糖体大亚基和小亚基RNA分别设计了大亚基探针(LSU probe)和小亚基探针(SSU probe),发展了对微型原甲藻进行定性和定量分析的双特异探针技术.分析数据表明针对微型原甲藻核糖体大亚基RNA的LSU probe能够特异地将微型原甲藻和其他7种微藻分开,而且检测信号的强弱在一定的范围内与细胞数呈线性关系;由于针对微型原甲藻核糖体小亚基的SSU probe探针由于与具齿原甲藻存在核酸序列一致性,该探针与具齿原甲藻有严重的交叉反应,但未发现与海洋原甲藻和其他藻的交叉反应.另外,研究还优化了破碎微型原甲藻细胞所需的超声时间以及获得探针的特异性所需的S1酶反应温度.本研究为实现对微型原甲藻海水样品的快速准确监测奠定了基础.

作 者： 蔡青松 李荣秀 甄毓 米铁柱 于志刚 CAI Qing-song LI Rong-xiu ZHEN Yu MI Tie-zhu YU Zhi-gang   作者单位： 蔡青松,CAI Qing-song(中国科学院,上海生命科学研究院,上海,200031;中国科学院,研究生院,北京,100039)

李荣秀,LI Rong-xiu(上海交通大学,生命科学技术学院,上海200030)

甄毓,米铁柱,于志刚,ZHEN Yu,MI Tie-zhu,YU Zhi-gang(中国海洋大学,化学化工学院,山东,青岛,266003) 

刊 名： 海洋学报（中文版）  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA OCEANOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2006 28(6)  分类号： P716+5 Q749.2  关键词： 核糖体RNA   双特异探针技术   微型原甲藻?  

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