脂肪组织蛋白的提取方法

时间：2021-11-05 19:39:14 资料我要投稿

脂肪组织蛋白的提取方法

产品说明书

脂肪组织蛋白提取试剂盒

产品组成：

产品组成规格蛋白提取液蛋白酶抑制剂混合物

蛋白离心柱使用说明书

BB-31226-1

50T 25ml 100ul 25套 1

BB-31226-2

100T 50ml 200ul 50套 1

注：

● 蛋白提取液：含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。提取液中已含有磷酸酶抑制剂混合物。

● 蛋白酶抑制剂混合物：包含7种独立的蛋白酶抑制剂，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64、EDTA。注意：

1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。

2、如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

储存条件：

蛋白酶抑制剂-20℃保存；

蛋白提取液和离心柱室温保存。

有效期：

一年。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。 ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管

底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的.玻璃器皿必须在使用前清

洗并彻底清除残留清洁剂。 ● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介：

贝博脂肪组织蛋白提取试剂盒适用于从各种脂肪含量高的实体组织和细胞，如脂肪细胞、脂肪肝细胞、脑、脂肪、脂肪肝脏、结缔组织、胸腺组织等动物组织中提取总蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等www.beibokit.com www.bestbio.com.cn - 1 -

产品说明书

下游蛋白研究。

本试剂盒提取的蛋白不可用于2D电泳。如下游实验需要用于2D电泳，请使用货号BB-3181的试剂盒。

产品特点：

1、使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。 2、将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。 3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。 4、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包

含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项： ? ? ? ? ? ?

旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。 Western实验内参可以选用beta-actin、GAPDH、Tubulin。更多蛋白提取常见问题分析等资料可以联系本公司索取。

1. 提取液制备：每500ul蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置

冰上备用。

2. 取100mg组织样本剪碎，加入蛋白提取液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼

①

可见固体。

3. 将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。 4. 将含有脂肪的上清吸入蛋白离心管中，套上液体收集管，在4℃，12000rpm条

件下离心5分钟。

5. 将液体收集管中的液体吸入另一预冷的干净离心管，即可得到蛋白样品。 6. 将蛋白离心管中的脂肪杂质用吸头或合适工具刮出，即可用于处理上步未处理

完的样品或其他待处理样品。

7. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

注：

① 用液氮研磨的方法更佳，具体方法可以联系本公司bestbio@163.com索取详细资料。

www.beibokit.com www.bestbio.com.cn - 2 -

产品说明书