植物核蛋白-细胞质蛋白提取方法

时间：2021-11-05 19:33:53 资料我要投稿

植物核蛋白-细胞质蛋白提取方法

植物核蛋白和细胞质蛋白提取试剂盒

植物核蛋白-细胞质蛋白提取方法

产品组成：

产品组成规格提取液A

植物细胞核蛋白提取液B 植物胞质蛋白提取液C 蛋白酶抑制剂混合物

说明书

BB-3169-1 50 assays 25ml 10ml 2.5ml 250ul 一份

BB-3169-2 100 assays

50ml 20ml 5ml 500ul 一份

储存条件：

蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。

有效期：

一年。

产品简介：

贝博植物核蛋白和细胞质蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白和其它细胞质蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

使用方法：

1. 提取液制备：每500ul预冷的蛋白提取液A中加入2ul蛋白酶抑制剂；每200ul

蛋白提取液B中分别加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。 2. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg植物组织样本剪碎，采用以下一种方

法处理：

i. 加入500ul提取液A后用匀浆机/匀浆器匀浆。

ii. 置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入500μl冷的提取液 A。 iii. 加入500ul提取液A直接置冰上研磨。

3. 高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，100×g力条件下离心1分钟。 4. 收集上清，弃沉淀。

5. 将上清在4℃，600×g力条件下离心1分钟。 6. 收集沉淀，将上清移入另一干净的离心管。

7. 在沉淀中加入100-200μl冷的.提取液B，高速涡旋振荡15秒。 8. 置冰上40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。 9. 在4℃，16000×g条件下离心10分钟。

10. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到核蛋白。

11. 在步骤6中的上清中加入50ul胞质提取液C，高速涡旋振荡15秒，充分混匀。

12. 置冰上40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。 13. 在4℃，16000×g条件下离心10分钟。

14. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到细胞质蛋白。

①②

15. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。