人红细胞血型糖蛋白GYPC的克隆与表达
目的:克隆人红细胞血型糖蛋白C(GYPC)基因,构建GYPC重组逆转录病毒载体,以获得稳定表达GYPC的L929细胞.方法:RT-PCR扩增入GYPC基因,克隆入T载体后,将GYPC双酶切亚克隆入逆转录病毒载体pEGZ,用此重组载体转染L929细胞,Zeocin筛选得到阳性克隆;用RTPCR及流式细胞术等方法对重组载体进行鉴定.结果:克隆了人GYPC基因,并获得稳定表达GYPC的L929细胞系.结论:应用基因工程技术,成功构建了含人GYPC基因重组逆转录病毒载体和稳定表达人GYPC的细胞株,建立了红细胞血型抗原的异源表达系统,为血清中抗GYPC特异性抗体的检测及GYPC单克隆抗体的制备和研究奠定了基础.
作 者： 陈琦 洪光 刘进 李厚达 作者单位： 陈琦(扬州大学,医学院生理学教研室,江苏,扬州,225001;扬州大学,比较医学中心,江苏,扬州,225001)洪光,刘进,李厚达(扬州大学,比较医学中心,江苏,扬州,225001)
刊 名： 细胞与分子免疫学杂志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(3) 分类号： Q786 关键词： 血型糖蛋白C 逆转录病毒 转染 基因表达