靶向EGFR基因的siRNA表达载体构建及其生物学效应的研究

靶向EGFR基因的siRNA表达载体构建及其生物学效应的研究

目的构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSi-EGFR),并观察其抑制人肺腺癌细胞株A549中EGFR基因表达的效果及生物学效应.方法利用Lipofectamine2000将构建的pSi-EGFR载体转入A549细胞中,应用实时定量荧光PCR、免疫荧光和流式细胞仪检测EGFR基因mRNA和蛋白水平的表达,并采用四甲基偶氮唑蓝显色法(MTF)、集落形成实验观察细胞生长变化.结果pSi-EGFR可显著抑制A549细胞中EGFR基因的表达;转染pSi-EGFR细胞生长抑制率为67.8%,集落形成抑制率为59.4%.结论pSi-EGFR载体能够在A549细胞中引发RNA干扰(RNAi)效应下调EGFR基因表达来抑制细胞增殖.

作 者： 白莉 祝蓉 陈智鸿 白春学 高磊 张新 BAI Li ZHU Rong CHEN Zhi-hong BAI Chun-xue GAO Lei ZHANG Xin   作者单位： 复旦大学附属中山医院呼吸内科,上海,200032  刊 名： 第三军医大学学报  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE  年，卷(期)： 2005 27(23)  分类号： Q782 Q786 R73-362  关键词： 表皮生长因子受体   RNA干扰   肺腺癌   细胞   生长