利用siRNA干扰MGMT基因表达的初步研究

利用siRNA干扰MGMT基因表达的初步研究

目的采用RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术,通过构建人O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase gene, MGMT)基因的特异性siRNA(small interfere RNA)真核表达载体,体外观察对人MGMT(hMGMT)基因的沉默作用.方法将合成的发卡样特异性hMGMT RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体并转染体外HelaS3细胞株,以半定量RT-PCR法检测hMGMT mRNA的表达水平,以MTT法检测转染后HelaS3细胞对BCNU的敏感性变化.结果成功构建MGMT siRNA的真核表达载体;所构建的载体能够特异性降低hMGMT mRNA的表达水平,转染后HelaS3细胞对BCNU的敏感性增加.结论该RNA干扰真核表达载体可以特异性干扰hMGMT基因的表达.

作 者： 王芳 周紫垣 刘胜学 曹佳 WANG Fang ZHOU Zi-yuan LIU Sheng-xue CAO Jia   作者单位： 第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室,重庆,400038  刊 名： 第三军医大学学报  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE  年，卷(期)： 2006 28(11)  分类号： Q503 Q782 Q786  关键词： O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因   RNA干扰   HelaS3